▎核心原理

利用特异性化学交联剂，将溶液相中空间可达距离内的蛋白氨基酸侧链进行共价交联，使瞬时/弱相互作用的蛋白形成稳定的交联复合物，保留蛋白天然互作状态与空间构象；将交联后的蛋白复合物进行酶解处理，得到交联肽段与非交联肽段；通过肽段富集技术筛选出目标交联肽段，再经 LC-MS/MS 液质联用技术进行质谱检测与鉴定，结合专业数据分析，定位蛋白间的相互作用界面、确定氨基酸结合位点，同时基于交联距离约束，解析蛋白的空间拓扑结构与构象动态变化。

▎技术优势

• 交联剂可将短暂结合、低亲和力的互作蛋白共价连接，稳定保存原本易解离的蛋白复合物，填补传统技术难以检测弱/瞬时PPIs的空白。

• 依托高效的LC-MS/MS检测平台与自动化数据分析流程，可实现高通量蛋白样品的检测与解析，大幅缩短实验周期。

• 可直接在细胞内进行交联反应，还原蛋白在原生细胞环境中的真实相互作用状态，避免体外纯化导致的蛋白构象与互作关系改变。

• 对蛋白样品无特殊化学标记要求，简化样品前处理流程，降低实验操作难度，同时避免标记对蛋白结构与互作的干扰。

• 可与冷冻电镜（Cryo-EM）、X - 射线晶体衍射技术联合使用，为蛋白结构解析提供距离约束与互作数据，辅助提升结构解析的精准度与完整性。

• 不仅能鉴定蛋白间的相互作用关系，还能定位具体结合位点、绘制 PPI 网络，同时解析蛋白构象动态变化与空间拓扑结构。

▎应用领域

• 为冷冻电镜、X-射线晶体衍射等技术提供蛋白间的距离约束与互作界面数据，辅助构建更精准的蛋白三维结构模型，同时验证结构解析结果的合理性

• 系统鉴定细胞内某一通路、某类蛋白家族的相互作用关系，绘制完整的PPI网络，揭示蛋白间的调控关系与作用模式

• 解析蛋白在结合配体、激活 / 抑制状态下的构象动态变化，同时在细胞原位层面研究蛋白的天然互作状态与构象特征

• 鉴定信号通路中关键蛋白的相互作用位点与调控关系，阐明信号传导的分子机制，发现通路中的新型调控蛋白与互作模式

• 解析药物靶点蛋白与上下游互作蛋白的结合界面，验证靶点蛋白的功能重要性，同时为药物设计提供蛋白互作层面的依据

• 解析多亚基蛋白复合物的组装顺序、亚基间的结合位点与空间排布，揭示蛋白复合物的组装机制与功能实现的结构基础

▎服务流程

• 交联反应：根据研究需求选择适配的化学交联剂，对体外纯化蛋白复合物或细胞内原生蛋白进行溶液相交联，使空间邻近的氨基酸侧链形成共价键。

• 蛋白酶解：将交联后的蛋白 / 蛋白复合物进行酶切处理，将大分子蛋白降解为小分子肽段，得到交联肽段与非交联肽段的混合物。

• 肽段富集：采用专属富集技术对混合物中的交联肽段进行特异性筛选与富集，去除非交联肽段，提高后续检测的针对性与效率。

• 质谱检测：将富集后的交联肽段进行LC-MS/MS液质联用检测，获取肽段的质荷比、序列等核心质谱数据。

• 质量控制：对质谱检测数据进行严格的质量评估与过滤，剔除无效数据，保证后续分析的准确性。

• 数据分析：通过专业软件对质谱数据进行解析，定位蛋白互作的氨基酸结合位点、确定交联距离约束，绘制 PPI 网络并解析蛋白空间拓扑与构象动态。

▎核心价值

• 可捕获传统技术难以检测的瞬时/弱蛋白相互作用，还原蛋白天然的互作与构象状态，为科研提供全新的结构与互作数据。

• 与冷冻电镜、X-射线晶体衍射等平台形成互补，构建 “互作分析 + 结构解析” 的一站式结构生物学研究解决方案。

• 从交联剂选择、样品前处理到质谱检测、数据分析，由专业的技术团队全程把控，为客户提供定制化实验方案与精准的数据分析结果。

• 适配结构生物学、细胞生物学、分子生物学、药物研发等多领域研究需求，助力揭示蛋白功能与分子调控机制，加速科研成果转化。